FITC标记试剂盒提供了FITC标记所需全部试剂,用于含有氨基(NH2-)抗体的标记。FITC已经特殊处理,可直接使用,每个试剂盒足以完成3次标记,每次可标记0.1-2mg抗体。试剂盒中包括6个用于抗体标记脱盐的Filtrationtube,不用透析,操作简便,熟练操作100min可完成整个标记过程。
产品特点:
1、本试剂盒提供了FITC标记所需全部试剂。
2、快速:整个过程仅需100min。
3、方便:通过Filtrationtube即可脱盐,无需透析或者凝胶过滤。
4、使用灵活:既可用于微量标记又可大量标记,每次可标记0.2-2mg抗体。
5、理想的标记效果:已经优化确定了标记比例,降低标记不足或由于过度标记而失活的可能性。
FITC标记反应原理:
蛋白质分子的赖氨酸残基的游离氨基可与FITC发生亲核反应,形成硫脲连接而共价结合。
FITC标记试剂盒操作步骤:
1.取1mg待标记抗体于Filtrationtube中,并加入相应体积的LabelingBuffer至总体积为0.5mL,12,000×g离心10min。(注:①Filtrationtube的体积为0.5mL。②待标记抗体浓度低时,可先超滤离心一次。)
2.溶解FITC:加入30μLDMF至FITC瓶中,静置10min,待其充分溶解,此时FITC的浓度为10mM。
3.立即加入13.3μLFITC和适量LabelingBuffer至上述Filtrationtube中,使抗体的终浓度为2mg/mL,并轻轻吹打混匀。放入37℃恒温箱中避光温育30min。
4.12,000×g离心10min。
5.加入适量LabelingBuffer至上述Filtrationtube中,使终体积为0.5mL,并轻轻吹打混匀,12,000×g离心10min。并重复操作一次。
6.加0.2mLLabelingBuffer至Filtrationtube中,轻轻吹打。将滤芯倒转放置于另一个离心管中,6,000×g离心10min。
7.收集离心管中的溶液,即为FITC标记的抗体。
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