产品组成
组分 |
规格 |
LabFD™ BamHI |
500ul |
10×LabFD™ Buffer |
3×1ml |
10×LabFD™ Color Buffer |
3×1ml |
产品简介
LabFD™快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在5~15分钟内精确完成DNA切割的高保真限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。LabFD™快速内切酶具有如下特点:5~15分钟内即可完成酶切;共用一种酶切Buffer,大大简化酶切反应体系;良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外,LABLEAD去磷酸化、连接试剂在LabFD™酶切Buffer中具有baifenzhibai活性,支持一管化反应,提升“酶切-修饰-连接”的体验。
建议反应条件
1×LabFD™缓冲液;
37℃温育;
参照“DNA快速酶切流程”配制反应体系。
失活条件
不可热失活,请使用酚氯仿抽提或柱纯化。
质量控制
功能活性检测
zshi反应温度下,在20ul反应体系中,1ulLabFD™ BamHI能够在15min内*消化1ugλDNA。
超长时间温育检测
zshi反应温度下,将1ul LabFD™ BamHI与1ugλDNA共同温育3h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。
酶切-连接-再酶切检测
zshi反应温度下,使用1ul LabFD™ BamHI消化底物,回收酶切产物。在22℃下使用适量Fast T4 DNA Ligase可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
非特异性内切酶活性检测
zshi反应温度下,将1ul LabFD™ BamHI与1ug超螺旋质粒DNA共同温育4h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒DNA仍然处于超螺旋状态。
蓝白斑检测
将含有单一lacZα基因的载体以1ul LabFD™ BamHI消化,重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞,涂布在含有对应抗生素、IPTG和X-gal的LB培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落,而连接错误(即DNA末端切口不完整)的产物将得到白色菌落。对于LabFD™系列限制酶而言,白色菌落比例应小于1%。
更多详情:
http://www.lablead.com.cn/SonList-2380584.html
https://www.chem17.com/st534943/product_37165473.html